GTBE電泳緩沖液(1×):高效分離DNA片段的科研利器GTBE電泳緩沖液(1×)是一種專為DNA電泳設計的緩沖液,廣應用于分子生物學實驗中,尤其適用于分離相對較小的DNA片段(小于2000bp)。其主要成分包括甘氨酸、TBE(Tris-硼酸-EDTA)緩沖液。產品特點與優勢高效分離能力:GTBE緩沖液的緩沖能力較弱,但特別適合分離小于2000bp的DNA片段,能夠提供清晰的電泳條帶。兼容性高:該緩沖液可用于常規瓊脂糖凝膠電泳,也可用于脈沖場凝膠電泳,滿足多種實驗需求。穩定性強:GTBE電泳緩沖液(1×)在室溫下保存,有效期可達12個月,使用方便。使用方法制備凝膠:使用1×GTBE緩沖液制備瓊脂糖凝膠。加樣與電泳:將樣品加入瓊脂糖凝膠的加樣孔中,進行電泳。染色與觀察:電泳結束后,使用合適的核酸染料(如EB或GoldView)對凝膠進行染色,并在紫外透射儀下觀察結果。注意事項安全操作:為確保實驗安全,操作時需佩戴實驗服和一次性手套。保存條件:產品應保存于室溫,避免長時間暴露在高溫或強光下。使用期限:GTBE電泳緩沖液(1×)的有效期為12個月,建議在開封后盡快使用。Plant Direct PCR Master Mix (2×) (Without Dye)是一種專門針對植物樣本設計的高效PCR預混液,它無需提取DNA。浙江大腸桿菌表達VLP技術服務
畢赤酵母表達系統的密碼子優化是提高外源蛋白表達效率的重要策略之一。密碼子優化主要涉及以下幾個方面:1.密碼子使用偏好:通過檢查畢赤酵母基因組的密碼子偏好譜,可以確定密碼子翻譯效率和使用頻率之間的直接相關性。2.密碼子優化策略:對目的基因進行密碼子優化,以適應畢赤酵母的密碼子使用偏好。這通常包括將基因中的密碼子修改為畢赤酵母偏好的密碼子,從而提高mRNA的翻譯效率。3.GC含量調整:密碼子優化過程中,需要考慮外源基因的GC含量,以避免由于GC含量過高或過低導致的mRNA結構不穩定或轉錄提前終止的問題。4.避免稀有密碼子:去除或替換那些在畢赤酵母中使用頻率較低的稀有密碼子,以減少翻譯過程中可能出現的障礙。5.提高表達水平:通過密碼子優化,可以顯著提高外源蛋白在畢赤酵母中的表達水平,有時甚至可以提高數倍到數十倍。6.基因工程應用:在實際應用中,例如人溶菌酶基因的密碼子優化,通過使用畢赤酵母偏好的密碼子替換原有密碼子,成功提高了基因在畢赤酵母中的轉錄表達水平。北京CHO細胞穩定表達技術服務通過基因工程技術,將編碼抗體的基因插入到表達載體中,并在適當的表達系統中進行高效表達。
DNA Marker VII:精細助力分子生物學實驗在分子生物學研究中,DNA Marker VII是一種廣使用的DNA分子量標準,主要用于瓊脂糖凝膠電泳中分析DNA片段的大小。它由6條帶狀雙鏈DNA條帶組成,覆蓋300 bp到2500 bp的分子量范圍,具體條帶大小分別為300 bp、500 bp、1000 bp、1500 bp、2000 bp和2500 bp。DNA Marker VII具有明顯的實驗優勢。其中,1500 bp的條帶濃度為100 ng/5 μL,顯示為加亮帶,便于快速定位和半定量分析,而其他條帶濃度約為50 ng/5 μL。此外,該產品已預混1×loading buffer,可直接取2-5 μL進行電泳,操作簡便,電泳圖像清晰。在實驗中,DNA Marker VII適用于多種瓊脂糖凝膠濃度,建議電泳條件為1.0%的凝膠濃度、5-7 cm的凝膠長度、4-10 V/cm的電壓,電泳時間約為20-25分鐘。通過EB染色或Goldview等染料進行染色后,可在紫外燈下清晰觀察條帶。DNA Marker VII的保存條件為-20℃,有效期可達一年,短期頻繁使用可置于4℃保存。它不僅適用于DNA片段大小的確定,還可用于DNA含量的粗略定量,但不適用于精確定量。總之,DNA Marker VII憑借其清晰的條帶、便捷的操作和穩定的性能,已成為分子生物學實驗中不可或缺的工具,為科研人員提供了可靠的分子量參考。
CRISPR-Cas9技術在金黃色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)基因組編輯中的應用主要體現在以下幾個方面:1.基因敲除與功能研究:通過設計特定的sgRNA,利用CRISPR-Cas9技術可以高效地在金黃色葡萄球菌基因組中實現基因敲除,進而研究這些基因的功能。例如,研究者利用CRISPR-Cas9技術成功構建了srtA基因敲除的金黃色葡萄球菌,分析其對菌株毒力的影響。2.耐藥性研究手段開發:金黃色葡萄球菌,特別是耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA)和耐萬古霉素金黃色葡萄球菌(VRSA),因其耐藥性帶來了巨大挑戰。CRISPR-Cas9技術可用于研究耐藥機制,并開發新型手段。季泉江教授課題組與韓大力研究員課題組合作,在金黃色葡萄球菌中建立了單堿基編輯技術,有助于加快耐藥機制研究和藥物靶標發現。3.基因編輯技術的優化:CRISPR-Cas9技術在金黃色葡萄球菌中的應用還包括對編輯技術的優化。例如,研究者開發了基于CRISPR/Cas9的單質粒系統,允許在金黃色葡萄球菌中進行快速有效的染色體操作,該系統可以實現無標記、和快速的遺傳操作,加速了金黃色葡萄球菌基因功能的研究。評估抗體的免疫原性,包括其在實驗動物體內誘發的免疫反應。這通常涉及對抗體藥物的抗藥抗體進行檢測。
10×MOPSRNA緩沖液是一種常用于RNA電泳的試劑,以下是使用10×MOPSRNA緩沖液進行RNA電泳的步驟:1.準備凝膠:-將瓊脂糖粉末與10×MOPSRNA緩沖液混合,比例通常為1%至2%的瓊脂糖溶液。例如,對于1%的瓊脂糖凝膠,取1克瓊脂糖粉末加入100毫升的1×MOPS緩沖液中。-加熱混合溶液至瓊脂糖完全溶解。2.稀釋緩沖液:-將10×MOPSRNA緩沖液用DEPC處理的超純水或無菌水稀釋至1×工作濃度。例如,取100毫升的10×MOPSRNA緩沖液,加入900毫升的DEPC水,充分混勻。3.制備凝膠板:-將溶解好的瓊脂糖溶液倒入凝膠模具中,插入梳子以形成樣品孔。-待凝膠凝固后,取出梳子,準備上樣。4.樣品準備:-將RNA樣品與適當的上樣緩沖液(如甲醛上樣緩沖液)混合,通常按1:1的比例。-如果需要,可以在65-70℃下加熱樣品5-10分鐘進行變性處理。5.裝載電泳槽:-將制備好的1×MOPSRNA緩沖液倒入電泳槽的兩個槽中,確保凝膠板被緩沖液完全浸沒。6.上樣:-加載RNA樣品到凝膠孔中。通常使用微量移液器進行操作,確保樣品完全進入孔中。果。aq DNA Polymerase在74°C下每30分鐘可催化10 nmol的脫氧核糖核酸聚合成多核苷酸片段適合常規PCR及高通量PCR。吉林人膠原蛋白開發技術服務研發
在分子生物學實驗中,DNA Marker V是一種廣使用的DNA分子量標準,主要用于瓊脂糖凝膠電泳中分析DNA片段大小。浙江大腸桿菌表達VLP技術服務
PhusionDNAPolymerase是一種高保真聚合酶,廣泛應用于分子生物學實驗中,以下是一些實驗操作中的注意事項:1.反應體系配置:在50μL的反應體系中,建議使用1.5μL的5×PCREnhancer(如果需要)和0.5μL的PhusionDNAPolymerase,并補足超純水至50μL。如果反應體積不同,各組分需按比例調整。2.緩沖液選擇:對于GC含量較高的模板或具有復雜二級結構的序列,建議使用5×PhusionGCBuffer代替5×PhusionHFBuffer進行PCR反應。3.酶的添加:PhusionDNAPolymerase加入反應體系中,以避免其3-5外切酶活性降解引物。4.Mg2+濃度:5×PhusionHFBuffer中已含有1.5mMMgCl2。根據PCR反應的特點,如有必要,可額外添加MgCl2。5.dNTPs的使用:應使用200μM的每種dNTP,并且不要使用dUTP,因為PhusionDNAPolymerase不能有效利用dUTP或其衍生物。6.引物設計:設計18-35個堿基的引物,GC含量在40-60%之間,避免引物3端互補或Tm差異超過10°C。7.模板DNA的量:對于低復雜性DNA(如質粒、噬菌體或BACDNA),每個50μL反應的優量為0.01-10ng;對于基因組DNA,優量為5-100ng。position:absolute;left:505px;top:263px;">浙江大腸桿菌表達VLP技術服務